期刊简介

  本刊是经国家新闻出版总署批准、由中华人民共和国卫生部主管、中华预防医学会主办、国内外公开发行的中央国家级医学专业期刊。刊物宗旨:宣传全科医学知识,传播全科医学技术、方法及全科医学理念;建立和完善以病人为中心,以家庭为单位,以社区为范围的服务网络;开拓研究领域,介绍研究成果和学术成就,促进全科医学信息的传播和学术交流,繁荣和发展全科医学事业。刊物主要面向基层广大医务人员、医学院校广大师生,以及从事全科医学基础、临床、科研、教学、管理工作者。

         

首页>中华全科医学杂志
  • 杂志名称:中华全科医学杂志
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会;安徽省全科医学会
  • 国际刊号:1674-4152
  • 国内刊号:11-5710/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2007年荣获中华预防医学会系列杂志优秀期刊奖期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
中华全科医学杂志2011年第05期

人CD123稳定表达细胞株的建立与鉴定

杨漾;黄亮;王娜;周剑峰

关键词:人CD123, 稳定表达, CHO-S细胞株, 细胞筛选
摘要:目的 探索建立人CD123稳定表达细胞株的方法,为进一步实现人CD123的抗体规模化生产提供材料.方法 构建人CDl23 CDS区真核表达载体(hCD123 CDS-PEGFP-N1);经脂质体包裹转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-S;经流式分选结合G418筛选,并用流式细胞术和Western印迹法检测人CD123蛋白的表达情况,初步筛选出人CD123高表达的CHO-S细胞株;并进一步用经人CD123Fc重组融合蛋白免疫的小鼠血清检测该细胞株hCD123表达情况.结果 测序及GenBank中序列比较结果显示扩增到的人CD123基因序列是正确的,酶切结果表明表达质粒构建正确;流式分选结合G418筛选得到1个人CD123高表达的细胞株--克隆8G9 CHO-S,其CD123-APC阳性细胞百分数为92.07%,用融合蛋白免疫的血清检测各细胞株人CD123表达情况,结果显示克隆8G9 CHO-S细胞和对照CHO-S细胞的CD123阳性率分别为(97.94±1.93)%和( 2.84±1.35)%,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 建立了人CD123抗原稳定高表达的细胞株克隆8G9 CHO-S,为进一步实现人CDI23的抗体规模化生产及其导向治疗奠定了坚实的基础.