期刊简介
本刊是经国家新闻出版总署批准、由中华人民共和国卫生部主管、中华预防医学会主办、国内外公开发行的中央国家级医学专业期刊。刊物宗旨：宣传全科医学知识，传播全科医学技术、方法及全科医学理念;建立和完善以病人为中心，以家庭为单位，以社区为范围的服务网络;开拓研究领域，介绍研究成果和学术成就，促进全科医学信息的传播和学术交流，繁荣和发展全科医学事业。刊物主要面向基层广大医务人员、医学院校广大师生，以及从事全科医学基础、临床、科研、教学、管理工作者。
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首页>中华全科医学杂志
- 杂志名称：中华全科医学杂志
- 主管单位：国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会;安徽省全科医学会
- 国际刊号：1674-4152
- 国内刊号：11-5710/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2007年荣获中华预防医学会系列杂志优秀期刊奖期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
构建IL-4启动子区报告基因载体探讨甲基化对其启动子调控活性的影响
邹颖；顾军；王学民
关键词：白细胞介素4, 甲基化, 报告基因载体
摘要：目的 白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)在特应性皮炎等疾病的发病机制中发挥着关键的作用,但其基因甲基化改变与疾病相关性尚不明确.本研究通过构建荧光素报告基因载体,检测DNA甲基化对于IL-4基因启动子转录活性的影响.方法 以Jurkat细胞基因组DNA为模板,PCR扩增IL-4启动子调控序列片段,连接入克隆载体psiCHECK荧光素报告载体.采用补丁甲基化(patch methylation)技术,在体外对IL-4启动子基因片段进行甲基化处理,构建甲基化IL-4启动子报告基因载体.采用电穿孔转染技术,将psiCHECK-IL-4-promoter荧光素报告载体转染至Jurkat细胞,对甲基化和未甲基化载体的荧光素酶进行检测,比较其对IL-4基因转录水平的影响.结果 琼脂糖凝胶电泳证实获得了IL-4启动子区域基因序列,测序结果与Genbank中一致,成功构建了IL-4启动序列及其甲基化的psiCHECK-IL-4-promoter荧光素酶报告基因载体.经检测,甲基化报告基因载体的转录活性较未甲基化载体明显降低,相对比例为0.43∶1.结论 IL-4启动子序列低甲基化可导致其转录活性升高,上调IL-4表达水平.
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